美国新型免疫治疗--- T细胞+抗原（ANTIGEN）

活着大哥在美国有没有听说ALN-VSP的消息？据说正在作肝癌的临床试验，有望治疗其他所有癌症。

希望如此吧

学习学习 发表于 2012-12-10 00:33

                               
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活着大哥在美国有没有听说ALN-VSP的消息？据说正在作肝癌的临床试验，有望治疗其他所有癌症。

真的是在临床试验吗，多么希望有治愈的方法呀！·

现在我们的奢望不是治愈，而是与癌共舞，和平共处，长期生存。

学习学习 发表于 2012-12-10 00:33

                               
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活着大哥在美国有没有听说ALN-VSP的消息？据说正在作肝癌的临床试验，有望治疗其他所有癌症。

活着大哥您好!您总能给我们带来好消息,我也很关心ALN-VSP疗法,您在美国,能帮我们更多了解这方面的信息吗?谢谢!

小P 发表于 2012-12-10 14:12

                               
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活着大哥您好!您总能给我们带来好消息,我也很关心ALN-VSP疗法,您在美国,能帮我们更多了解这方面的信息吗? ...

本坛里早就讨论过该疗法，是两年前的旧闻，该公司在麻州，是美国上市公司，去年营业额8000万美金，亏损1600万，www.alnylam.com 文中的药叫ALN-VSP，主要是针对肝癌，目前已经完成一期临床试验，正准备第二期，目前没有什么新进展，似乎停止了；看到他们在研究ALN-TMP针对地中海贫血的相关疫苗（或药物），对ALN-VSP别抱什么希望吧！

今天纽约时报头版(网络版）关于相关治疗的报道。我对医学和生物是门外汉，不过纽约时报大多数情况下应该还是比较靠谱的。

“In Girl’s Last Hope, Altered Immune Cells Beat Leukemia” , (一个女孩的最后希望，改变了的免疫细胞打败了白血病）

概要： 6岁女孩因为严重白血病，生命垂危，化疗后两次复发，医生已经没有办法。父母在走投无路的情况下，选择参加宾州大学(UPenn)发明的T细胞改造疗法，从女孩自身提取的T细胞中加入抗癌基因，抗癌基因通过失去活性的艾滋病毒加入T细胞中。今年4月份参加治疗，现在已经完全恢复。

值得注意的是：
1。这种治疗的副作用也非同小可，报道中的女孩几乎因此丧命。治疗有效的标志就是病人会产生高温和全身发冷，病人自身的免疫系统会在短时间内产生大量的化学物质，这些物质会进入肺中或导致血压骤降，产生各种症状。女孩体温高达41度，失去知觉，全身肿胀，家人和朋友都准备送别了。血检结果表明白介素6超标，幸亏其中一位医生知道一种治疗类风湿的药可以降低白介素6，服用后果然有效。（下面一篇相关报道有对副作用更全面的描述）

2. 改造后的T细胞不只攻击癌变的B细胞，对正常B细胞也不放过。病人因此会容易感染，需要定期输入球蛋白进行治疗。

3. 已进行的病例中， 有人至今完全治愈两年以上，有人有所改善但后来复发，也有人完全无效。研究人员对于其中原因还不清楚。

4. 改造T细胞的成本现在是2万美元，若能商业化，成本会降低，但这并没有考虑医药公司和医药的利润，设备开销，以及科研投入开销。

5. 已有制药商对此投资两千万美元，进行进一步研究。
链接：http://www.nytimes.com/2012/12/1 ... ls.html?hp&_r=0

报道中提到的另外一例同样疗法的成功案例：
“An Immune System Trained to Kill Cancer”， （训练免疫系统杀死癌症）

概要：一位65岁的白血病患者在别无选择的情况下参加实验，也是高温，发冷，颤抖，血压降低，被送进ICU，差点丧命。现在已治愈一年多。

这个报道关于副作用介绍的更全面。改造后的T细胞会攻击正常组织，已有一名结肠癌患者因此死亡。还有一名白血病患者的死亡也和此治疗相关。研究人员希望把治疗应用到其它有实体瘤的癌症中， 包括间皮瘤和胰腺癌，但副作用是一个主要考虑。高烧， 肿胀，感染，血压降低，胸膜和腹膜破坏，都可以致命。即使
T细胞只攻击癌变细胞，短时间内大量死亡的癌细胞也可能对肾脏等造成损伤。

链接：http://www.nytimes.com/2011/09/1 ... wanted=all&_r=0

看大家热热闹闹的也没搞明白到底什么是T细胞疗法、T细胞疗法与DC-CIK有什么不同。

T细胞疗法---叫T细胞过继疗法。是将患者T淋巴细胞（淋巴细胞分T、B二种）分离出来后，经过基因转移嵌合抗原受体（chimeric antigen receptors，CARs），然后扩增、然后回输给病人。关键技术在转移了嵌合抗原受体（CAR），这是与CIK等的根本不同处。是一种非常有前途的治疗方法！大家等着吧。

下面贴一篇免疫学发表的综述给大家慢慢啃吧。

癌症的过继T细胞治疗
  
       肿瘤细胞表达抗原的特异性T细胞的过继转移是一种有吸引力的可产生长期靶向抗肿瘤活性的策略。T细胞治疗已在选择性的临床应用中显示出活性，但是更广泛的应用受到转移的T细胞持续存在时间不足及肿瘤逃避策略的限制。当前的研究集中在确定用于转移的最佳细胞类型，遗传修饰输注的T细胞以增强功能并克服肿瘤逃避策略以及调整宿主微环境。
引言
       利用细胞免疫系统的细胞毒力和靶向能力能显著地促进肿瘤治疗。尽管单克隆抗体治疗现在已在临床实践中很好地建立起来了，但是癌症的细胞免疫反应的利用步伐仍比较慢，很大程度上是因为它更复杂。在多种细胞免疫治疗形式中，T淋巴细胞的过继转移可能是迄今最成功的。例如，未经处理的供体淋巴细胞输注（donor lymphocyte infusions，DLI）已广泛用于治疗异基因造血干细胞移植（hemopoietic stem cell transplantation，HSCT）后恶性血液病复发的患者，然而，HSCT后的抗肿瘤反应与次要组织相容性或肿瘤相关抗原（如WT1）特异的多变化的T细胞反应的发生有关。而且，体外扩增的供体衍生的细胞毒性特异T淋巴细胞（cytotoxic specific T lymphocytes，CTLs）已被证明在防止或治疗病毒感染和EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）淋巴瘤移植后的发展方面很有效。在自体条件下，已跟踪观察到对患有黑素瘤、淋巴瘤和鼻咽癌的病人进行T细胞治疗的临床反应，进而了解到有效免疫治疗的需求。
       然而，癌症的T细胞免疫治疗面临着相当多的障碍。例如，可能产生免疫原性的肿瘤已演变出一系列被动的和主动的免疫逃避策略用以使免疫活化的后续行动失效，甚至出现免疫反应促进肿瘤生长的情况。被动逃避策略包括没能合适地呈递肿瘤抗原至免疫系统以及对肿瘤细胞呈现的自身抗原的持续耐受。日益明显的是免疫反应可能也选择已缺失靶标抗原的肿瘤变异体。例如，在单倍同一性HSCT后复发患AML的十七分之五的病人中，宿主6号染色体上编码不匹配HLA单倍体型的区域被删除了，随之而发生的是供体T细胞的抗肿瘤效应的主要靶标缺失了。对免疫力的主动破坏可能包括肿瘤微环境中降低T细胞存活力和功能的诸如TGFβ之类因子的存在和吸引调节或抑制T细胞而不是抗肿瘤T效应细胞的趋化因子的分泌。最近实验室的研究已阐明这些逃避策略中许多策略的分子基础，容许对可能有效的对策进行开发。
哪种细胞最适合用于转移呢？
       免疫治疗的一个限制是过继转移的细胞的持续存在时间不是最理想的。在过去的一年里，用于转移的可确保最理想持续存在时间和功能的最佳T细胞类型已得到广泛研究。在一个CMV感染的灵长目动物模型中，Berger等报道称只有中枢记忆性T细胞衍生的抗原特异的CD8克隆在体内持续存在很长时间并接近记忆性T细胞小生境。然而，在一个转基因或逆转录病毒转导的表达肿瘤特异T细胞受体的T细胞鼠类动物模型中，可看到初始T细胞衍生的效应细胞有较好的抗肿瘤活性。其他的研究显示诱导Wnt-beta-catenin表达可促进增殖和抗肿瘤能力增强的记忆性"干"细胞的产生，这些细胞比其他T细胞亚群在过继转移中更有效。这些最佳亚群的不同结论可能与所用模型息息相关，同时突出了是多因素决定了过继转移至复杂免疫网络的最佳表现型。目前，我们应该谨慎对待众多的观点主张，不应过度信任。
       从实践方面说，甚至用非最理想的细胞亚群获得长期重构显然是可能的。给予HSCT受体用于阻止或治疗EBV淋巴瘤的，基因标记的受体衍生的EBV特异细胞毒性T淋巴细胞（EBV-specific cytotoxic T lymphocytes，EBV-CTLs）的长期后续行动显示标记的细胞持续存在9年以上，因而转移的细胞已进入记忆库，即使输注的细胞系主要是效应记忆性表现型。这项研究中转移的产品包含CD4和CD8细胞，可能有利于细胞长期持续存在和发挥功能以及使T细胞能进入感染的组织。在确认细胞毒性最大的T细胞亚群方面，仅 CD4细胞就能诱导癌症的临床缓解，在一个报道中有这样的记载，NY-ESO-1特异的CD4克隆诱导患有黑素瘤的病人产生了持久的完全反应。在该报道中看到了有名的"表位扩展"，而且，转移的NY-ESO特异性免疫反应发生后，针对患者肿瘤细胞表达的MAGE-3和MART-1抗原的免疫活性随之增强。
       如果结果是对于特定的应用转移特定的细胞亚群会更好，那么对细胞因子环境进行处理可能会使其可行。在一项优化体外培养条件以确保经遗传修饰表达TK自杀基因的异基因供体T细胞保持其抗肿瘤活性（这个事例采用同种异体反应测定）的研究中，发现IL-7和IL-15是最理想的。同样地，灵长目动物研究已显示IL-15能使体内CD4和CD8细胞增加而毒性却很小，而临床试验显示施用IL-7耐受良好，IL-7优先扩增原始T细胞。因此，这些细胞因子可以与过继转移的理想T细胞亚群联合用于治疗。
用以增强和简化T细胞治疗的基因转移
       大部分肿瘤相关或肿瘤特异抗原是自体蛋白，由于克隆删除或无反应力造成的耐受，免疫系统对其仅有有限的反应。因此，在扩增和过继转移前从肿瘤患者分离得到的肿瘤抗原特异T细胞可能存在低亲和力T细胞受体（T cell receptors， TCRs）限制其抗肿瘤细胞的细胞毒性。研究者已通过利用基因转移表达高亲和力的转基因TCR ά和β链或表达合成嵌合抗原受体克服了这一局限。
人工άβ T细胞受体
       TCR的α和β链的cDNAs已从对肿瘤起反应的细胞毒性T细胞的Ⅰ类HLA限制的TCRs克隆得到并用整合载体转移到新的T细胞中，可能会赋予受体细胞与供体T细胞同样的抗原特异性。这种方法容许大量肿瘤抗原特异T细胞的快速生产。临床前研究显示αβTCR转基因T细胞的输注能根除体内肿瘤。最近，Morgan及其同事用MART-1特异TCRs遗传修饰的T细胞对黑素瘤患者进行治疗，并报道称两个患者出现转移性损伤退化且CTLs的持续存在时间延长，尽管他们也注意到该疗法对内耳和视网膜中表达黑色素细胞有毒性作用。然而，脱靶效应不只是专属于TCR研究，因为用于治疗白血病复发的次要组织相容性抗原特异的T细胞会产生短暂的治疗好处但在一些病例中也会因正常组织中靶标抗原的意外存在而出现细胞毒性，在这个例子中肺受到了影响。TCR基因转移的一个主要限制是杂交TCR的开发，杂交TCR是自身和转基因受体的杂合。这些TCRs通常缺失功能，但在临床前模型中可以观察到存在功能，产生自体反应和致命的移植物抗宿主病样综合症。现在正努力试图阻止交叉配对，表1对其进行了概括。
嵌合抗原受体（chimeric antigen receptors，CARs）
       取代用额外αβTCR转导T细胞，转移嵌合TCRs是可能的。把表示为单链Fv（singlechain Fv，scFv）分子的单克隆抗体的轻链和重链可变区与CD3 ζ链或Fc受体γ链衍生的跨膜或胞质信号转导结构域通过柔性间隔连接起来可能会生成嵌合TCRs。因此，他们在单个融合分子中结合了抗体的抗原特异性与T细胞的细胞毒性。
       因为CARs会以一种HLA非限制方式结合靶标抗原，他们可抵抗许多肿瘤免疫逃避机制，如HLAⅠ类分子下调和不处理或呈递蛋白。第一代CARs包含CD3ζ或Fc受体γ链衍生的胞质区作为它们的信号转导结构域。尽管这些受体成功地重定向了T细胞的细胞毒性，但它们不能刺激T细胞增殖和体内生存，可能是因为T细胞CAR衔接后缺少合适的共刺激信号。因此，在表2中总结的患有淋巴瘤、卵巢癌、成神经细胞瘤或肾癌的实验对象的临床试验疗效是适中的。
第二代CARs包含诸如CD28、OX40和4-1BB之类的单个共刺激分子衍生的胞质区内的信号导结构域，其抗原特异T细胞活化和扩增得到了改善。第三代CARs包含共刺激胞质区组合，但这样的受体可能会太容易被低亲和力"脱靶"结合引发反应或可能产生过强的活化信号，而该信号可能导致由细胞因子风暴引起的致命后果。另一种方法是在抗原特异T细胞内表达CARs，这样T细胞也将通过其自身αβTCR与专门的抗原呈递细胞上抗原的衔接及相伴的共刺激得以活化和扩增。例如，接受EBV特异的构建有成神经细胞瘤细胞上的双唾液酸神经节苷酯抗原GD2a特异CAR的CTLs（CAR-CTLs）的实验对象显示CAR-CTLs在体内持续存在时间比构建有相同CAR的非选择性T细胞更长，因为CAR-CTLs可（持续）遇到Epstein-Barr病毒抗原（表2）。持续存在时间更长与包含完全缓解在内的肿瘤反应有关。
       表1

       TCR：T细胞受体
       表2

       EBV：Epstein Barr病毒 CTL：细胞毒性T淋巴细胞
CR：完全缓解PR：部分缓解HyTK：潮霉素胸苷k
克服免疫逃避策略
       现有过继T细胞治疗的一个主要挑战是肿瘤诱导的免疫逃避机制可造成体外处理的过继转移的T细胞没有在体内扩增和保持。基因转移技术允许我们修饰T细胞并使其在不利环境中恢复功能。例如，许多肿瘤细胞或其相关基质会产生利于免疫耐受和T细胞无反应力发展的TGF-β因子，TGF-β与Tregs能诱导T效应细胞生长阻滞。Bollard及其同事研究表明人和鼠抗原特异T细胞在逆转录病毒转导后表达显性负性（dominant negative）TGF-β受体，抵抗TGF-β的抗增殖效应以保持其体内效应功能。也可修饰T细胞表达像IL-2、IL-7或IL-15这样的细胞因子或细胞因子受体，模拟淋巴再生和动态平衡重建时的环境条件。初步临床数据是令人鼓舞的，但是至今我们不能确认这些转基因细胞因子及其受体有多么安全，多么有效。            
       也有方法能使细胞毒性T细胞对小分子癌症疗法有抵抗力，小分子疗法中的许多可导致显著的免疫抑制。存在一些可能的办法，从药物代谢酶的引入到抗rapalog的MTOR的表达。其他研究者已构建出表达抗移植后常用免疫抑制药（如环孢霉素）的转基因钙调磷酸酶分子的T细胞或用特异小干扰RNA使FK506结合蛋白沉默，可能允许向通过免疫抑制药物阻止免疫系统排斥异基因细胞的患有癌症的实验对象施用异基因肿瘤特异T细胞。该方法的全部价值评估仍需建立。另一种方法是将细胞免疫治疗与抗体治疗相结合。在最近一项靶向CD20的免疫治疗小鼠模型报道中，同时使用的抗体治疗增强了cTCR(+) T细胞存活和控制肿瘤的能力，抗体治疗可去除表达抗原的正常组织。
       因为转导的T细胞具有在宿主持续存在一生和甚至增加细胞总数的潜力，由基因转移或基因修饰细胞引起的任何不良反应可能会随着时间的推移变得更糟。因而，"自杀"策略使用了能伴随目的基因并允许这种细胞暴露于特定信号后被破坏掉的另一个基因。最广泛应用的是单纯疱疹病毒胸苷激酶（thymidine kinase，Tk）基因，其产物会磷酸化丙氧鸟苷（ganciclovir，GCV）或无环鸟苷（acyclovir）的活性部分，这将干扰DNA合成。Tk基因已引入异基因T淋巴细胞，该种细胞可在干细胞移植后用于供体淋巴细胞输注。如果输注的细胞引起的是移植物抗宿主病而不是理想的抗病毒和抗白血病活性，施用GCV前体药可使输注的细胞失活。该方法的安全性和益处似乎是巨大的，且已进入临床Ⅲ期试验。尽管显著有效，Tk基因本身具有免疫原性，可导致不想看到的转导细胞群被除去。而且，对巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）感染的免疫受损病人来说，GCV是一种有用的药物；在这些病人中，无论是否需要，用GCV对付CMV都将引起细胞自杀。最后，Tk/GCV可能会限制实际杀伤细胞群的能力，尤其是那些有丝分裂后的细胞。因此，研究者正在开发另外的方法，如可诱导的Caspase9（icasp9）。因为icasp9是caspase途径中自然出现的成分，它应该是非免疫原性的且甚至在不发生细胞分裂的细胞中能引发凋亡。这种分子可由小分子dimeriser的施用诱发生成，dimeriser可使两种非功能性icasp9分子结合在一起以生成有活性的酶。该方法已开始临床试验。
T细胞治疗的更广泛实施
       如上所述，复杂的生物治疗的确是执行起来错综复杂。幸运的是，在前几段落所述的成功已促进方法发展，简化和加速改造的病毒特异或肿瘤特异CTLs的生产。一些研究者已对可提供快速抗原来源的人工抗原呈递细胞进行了评估，且临床试验正在使用由这些刺激细胞产生的T细胞。研究者也已研发出单培养产生对多抗原有抗病毒活性的CTL细胞系与可在封闭系统内准备细胞的迷你生物反应器。将这些技术联合起来，可允许在10天内而不是10周以上得到充足的病人治疗所需CTLs。而且，这些细胞系能存库并可作为"现成"试剂给予HLA部分匹配的病人。多个研究中心正在评估三病毒特异CTL细胞系在HLA部分匹配的异基因病人中是否对EBV、CMV和腺病毒有可能具有相似的活性。如果成功，向恶性疾病治疗的拓展将跟进。

GodBless 发表于 2012-12-10 15:27

                               
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今天纽约时报头版(网络版）关于相关治疗的报道。我对医学和生物是门外汉，不过纽约时报大多数情况下应该还是 ...

他们好像不是和活着说的同一个医院实验的。